Usher 综合征 (USH) II 型是最常见的 USH 类型，是世界上与失明相关的耳聋的主要遗传原因，目前尚无治愈方法。 USH2A 基因突变约占 USH2 病例的 70%。 基因编辑可以直接修复缺陷基因，为 USH2A 的治疗提供了一种有前途的治疗策略。 我们开发了一种携带 USH2A 基因移码突变的兔模型，并显示出早发、进行性光感受器变性，类似于在人类患者中观察到的视网膜色素变性 (RP) 症状。 与此同时，我们开发了一种改进的 spCas9 变体，命名为精细整合 Cas9 (miCas9)，它大大减少了在靶和脱靶插入和删除 (indel) 事件，并多次改进了敲入事件。 在这个项目中，利用这两条有前途的工作，我们建议在新型 USH2A 兔模型中开发 miCas9 介导的 USH2A 基因编辑疗法。 我们将使用培养的兔成纤维细胞和兔视网膜外植体来优化 CRISPR 试剂，并在 USH2A 患者衍生的 iPS 细胞和视网膜类器官中测试类似设计的编辑试剂。 最后，优化后的编辑试剂将在USH2A兔体内进行测试，以评估USH2A基因编辑疗法的编辑效率和安全性，包括靶向和脱靶效应、生物分布和毒性。 该项目的长期目标是生成数据以确保获得资金，以进一步证明 miCas9 介导的基因编辑是否可以用作治疗 USH2A 的新型治疗策略。